Introdução

Nos modernos laboratórios biomédicos e químicos,Tubos de cultura descartáveis ​​são amplamente utilizados em cultura de células, reações químicas, preservação de amostras e outras operações críticas.Sua importância no processo experimental não pode ser ignorada. Como esses tubos de cultura estão em contato direto com as amostras experimentais, seu material, tamanho, fechamento e até mesmo a esterilização terão um impacto significativo nos resultados experimentais. A seleção inadequada pode levar à contaminação cruzada, perda de amostras ou viés nos dados experimentais, afetando assim a precisão e a reprodutibilidade do estudo.

Principais tipos de tubos de cultura descartáveis

Existe uma ampla gama de tubos de cultura descartáveis, e os pesquisadores precisam escolher o tipo certo de acordo com a finalidade do experimento, o ambiente operacional e as características das amostras. Eles são categorizados nos três seguintes aspectos: material, capacidade e função especial:

1. Classificação por material

Tubos de cultura descartáveis ​​feitos de diferentes materiais diferem em resistência à temperatura, estabilidade química e propriedades ópticas:

• Polipropilenoe: Boa resistência à alta temperatura e corrosão química, adequado para cultura de células de rotina, experimentos de biologia molecular e outras aplicações.
• Poliestireno: alta transparência, fácil de observar o estado líquido e celular, comumente usado em testes ópticos, mas não é resistente a altas temperaturas, geralmente não pode ser usado para autoclavagem.
• Tubos de cultura de vidro:Embora reutilizáveis ​​e quimicamente estáveis, eles são caros, exigem procedimentos adicionais de limpeza e esterilização e apresentam um risco potencial de contaminação cruzada.

2. Classificação por capacidade

Dependendo do volume de amostra necessário para o experimento, a capacidade dos tubos de cultura varia de micro a grandes volumes:

• Tubos de microcentrífuga: comumente usado para distribuição de amostras, precipitação centrífuga, extração de DNA/RNA e outras operações.
• Tubos de cultura padrão: a capacidade mais comumente usada em laboratório, adequada para cultura de células, reação de mistura, preservação de amostras e outros fins.
• Tubos de cultura de grande capacidade: adequado para cultura de células em larga escala ou processamento de grandes quantidades de soluções.

3. Classificação por função especial

Os tubos estão disponíveis com uma variedade de recursos adicionais para atender a necessidades experimentais específicas:

• Tubos pré-esterilizados assépticos: esterilizado em fábrica por radiação gama ou autoclave, adequado para experimentos com altos requisitos assépticos.
• Com tampa de cartucho: permite a troca gasosa, adequado para microrganismos ou linhas celulares que requerem aeração e evita a contaminação de fontes exógenas.
• Tubos resistentes a baixas temperaturas: pode ser usado com segurança em ambientes de -80℃ ou até mesmo nitrogênio líquido, adequado para preservação de amostras biológicas em baixa temperatura a longo prazo.
• Tubos graduados/não graduados: Tubos graduados são convenientes para estimativa rápida e distribuição de volume de líquido para aumentar a eficiência dos experimentos.

Fatores-chave na seleção de tubos de cultura

No processo de planejamento e operação de experimentos, a seleção de tubos de cultura descartáveis ​​adequados é crucial para garantir a eficiência experimental e a precisão dos resultados. Os pesquisadores devem considerar de forma abrangente vários fatores-chave:

1. Tipo de experimento

Os requisitos para tubos de cultura variam significativamente de experimento para experimento e devem ser selecionados de acordo com o conteúdo da operação e o ambiente experimental:

• Para cultura de células: os requisitos de esterilidade são extremamente altos, e o uso de tubos pré-esterilizados estéreis com tampas de cartucho respiráveis ​​para garantir a troca gasosa é recomendado.
• Experimentos de PCR/biologia molecular: precisam estar livres de enzimas de DNA, enzimas de RNA e tubos livres de pirogênios, geralmente usam tubos de polipropileno de qualidade limpa.
• Armazenamento em baixa temperatura: Tubos com boa resistência a baixas temperaturas devem ser usados ​​para evitar lise em baixas temperaturas.

2. Características da amostra

As propriedades físico-químicas da amostra influenciam diretamente na escolha do material e na configuração funcional dos tubos de cultura:

• Amostras líquidas ou sólidas: determina o volume necessário e a forma do orifício do tubo.
• Amostras ácidas ou alcalinas: amostras altamente corrosivas requerem materiais quimicamente resistentes para evitar deformação ou contaminação do tubo.
• Se deve evitar a luz: amostras sensíveis à luz devem escolher tubos de cultura de material âmbar ou opaco, para evitar fotodegradação.

3. Requisitos de esterilização

A necessidade de esterilização e o tipo de esterilização utilizado são considerações importantes na seleção do tubo:

• Pré-esterilização vs. autoesterilização: produtos pré-esterilizados de fábrica são adequados para experimentos de alto rendimento, economizando tempo; se o laboratório tiver equipamento de esterilização em autoclave, você pode escolher tubos PP que podem ser autoclavados.
• Compatibilidade de esterilização: Por exemplo, o material PS não é adequado para autoclavagem e é de uso único.

4. Compatibilidade

Os tubos devem ser bem adaptados ao equipamento do laboratório para garantir um funcionamento suave e resultados confiáveis:

• Compatibilidade centrífuga:Os tubos usados ​​para centrifugação precisam ser estruturalmente fortes para suportar forças centrífugas em altas velocidades de rotação.
• Compatibilidade de automação:Para experimentos que exigem o uso de robôs de pipetagem, sistemas de distribuição automatizados, etc., tamanhos de tubos padronizados devem ser usados.

5. Custo e sustentabilidade

O controle razoável de custos e consumo de recursos também é uma consideração importante para atender às necessidades experimentais:

• Descartável vs. reutilizável: tubos descartáveis ​​são fáceis de manusear e evitam contaminação, adequados para experimentos de alto rendimento; tubos de vidro reutilizáveis ​​são adequados para experimentos básicos com orçamento limitado.
• Escala de compra: a compra em grande volume pode reduzir o preço unitário, adequado para projetos de longo prazo e grande escala; especificações personalizadas em pequena escala são mais flexíveis, mas têm custo relativamente alto.

Recomendações para cenários de aplicação comuns

De acordo com as necessidades específicas de diferentes tipos de experimentos, os seguintes tubos de cultura descartáveis ​​são recomendados para vários cenários de aplicação comuns, visando melhorar a eficiência e a confiabilidade dos experimentos:

1. Cultivo de células

• Tipo recomendado: tubos de cultura estéreis de polipropileno com tampas de cartucho respiráveis
• Razão: O material de polipropileno possui boa inércia química e biocompatibilidade, sendo adequado para fluidos de cultura celular. A tampa do cartucho permite trocas gasosas eficazes, previne contaminação microbiana e atende ao ambiente gasoso necessário para a proliferação celular.

2. Realização molecular de PCR/qPCR

• Tipos recomendados: tubos de PCR especializados, livres de nucleases e pirogênios, ou tubos de microcentrífuga
• RazãoTubos de polipropileno de alta pureza, após tratamento rigoroso, podem efetivamente evitar a degradação ou contaminação da amostra, garantindo resultados de amplificação precisos e confiáveis. Recomenda-se o design de parede fina para melhorar a eficiência da transferência de calor.

3. Armazenamento em baixa temperatura

• Tipo recomendado:Tubo de polipropileno resistente a baixas temperaturas com design anticongelante e tampa de vedação de rosca
• Razão: Estes tubos podem ser usados ​​para armazenar amostras por longos períodos a -80 °C ou mesmo em nitrogênio líquido, e a estrutura especial evita que o tubo rache e vaze a amostra. Adequado para armazenamento de longo prazo de linhagens celulares, amostras de sangue, proteínas ou ácidos nucleicos.

4. Centrífuga

• Tipos recomendados: tubos de polipropileno de alta tolerância, com fundo redondo ou cônico, com rotores centrífugos
• Razão: Os tubos de PP possuem boa resistência centrífuga e podem suportar altas forças centrífugas sem deformação ou ruptura. O fundo cônico ajuda a coletar células ou precipitados centralmente, aumentando a taxa de recuperação.

Erros comuns e maneiras de evitá-los

Na prática, falhas experimentais devido à seleção inadequada de tubos de cultura ocorrem ocasionalmente. Alguns erros comuns e sugestões de soluções correspondentes estão listados abaixo para referência dos pesquisadores:

1. Uso indevido de materiais não resistentes a altas temperaturas para autoclavagem